易错PCR 2×Mix为低忠实性Taq DNA聚合酶、易错DNA聚合酶、dNTPs、适合随机突变的反应缓冲液的混合物,浓度为2×。扩增目的DNA时,只需在2×Mix中,加入模板、引物和水,使2×Mix溶液的浓度为1×即可进行PCR反应。扩增产物经纯化后可以利用本公司的T4 DNA连接酶(SB-EGR105S)进行基因克隆。其中单片段基因重组克隆试剂盒为不依赖于DNA连接反应的基因克隆试剂盒,克隆数和阳性克隆率高,可以方便的将随机突变的DNA克隆到目的载体中,使用方法详见产品说明书。由于易错PCR2×Mix采用的是Taq DNA 聚合酶,PCR产物的3’端会附加一个A碱基,因此建议在进行平端连接酶克隆或单片段基因重组克隆之前进行平端化处理,去除3’端A碱基,以提高克隆效率和阳性克隆数。
特点:
目的DNA片段的扩增长度达4-5 kb;
随机突变率可控,突变率在1-2个碱基/kb;
兼容单片段基因克隆试剂盒:一步式无缝克隆,阳性克隆率和克隆数高;
兼容3’平端化试剂盒,提高阳性克隆数。 适用范围: 基因的可控随机突变,引入突变碱基。