本试剂盒是利用拓扑异构酶（Topoisomerase）高效快速连接 DNA 片段的原理进一步研发而成，与传统的 T4 连接酶相 比，具有以下优势：

1）快速，仅需5分钟即可完成连接反应。

2）高效，阳性克隆率接近 100%，无需设置蓝白斑筛选。

3）可连接长达 5 kb 目的产物。

4）所插入片段为不含A尾的PCR产物（可利用常规高保真酶如Pfu、KOD等扩出，且引物不能磷酸化），扩增得到的产物可回收后连接，也可直接进行连接反应。