种属 羊
组织来源 正常卵巢组织
传代比例 1:2传代,消化2-3分钟。
完全培养基配置 基础培养基500 ml;生长添加剂5 ml;胎牛血清50 ml;双抗5 ml
简介 卵巢是雌性动物的生殖器官。卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经,卵巢是分泌雌激素的主要器官。卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。卵巢中颗粒细胞是合成雌激素的场所。其产生过程是使雄烯二酮转变成雌激素:内膜细胞在LH的作用下,使胆固醇转变为雄烯二酮;颗粒细胞在FSH的作用,发育过程中产生芳香化酶,它使雄烯二酮转变成雌激素。形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。
形态 不规则细胞样
生长特征 贴壁生长
细胞 卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
倍增时间 每周 2 至 3 次
换液频率 2-3天换液一次
培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37°C,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
备注 羊卵巢颗粒永生化细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因
【储存条件及期限】
T25瓶:观察好细胞状态后,75 %酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏