种属 羊
组织来源 正常结肠组织
传代比例 1:2传代
完全培养基配置 基础培养基500 ml;生长添加剂5 ml;胎牛血清10 ml;双抗5 ml
简介 结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:粘膜(上皮层,固有层,粘膜肌层),粘膜下层,肌层,外膜。结肠黏膜上皮在环境或遗传等多种致癌因素作用下导致结肠癌,是最常见的恶性肿瘤之一。因此,体外培养结肠黏膜上皮细胞为研究进一步结肠癌等疾病提供了前提和基础。
形态 铺路石状细胞样,不规则细胞样
生长特征 贴壁
细胞 细胞角蛋白-19(CK-19)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
倍增时间 每周 2 至 3 次
换液频率 2-3天换液一次
培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37°C,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
备注 羊结肠黏膜上皮细胞永生化细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
【储存条件及期限】
T25瓶:观察好细胞状态后,75 %酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏