种属 猪
组织来源 正常小肠组织
传代比例 1:2传代
完全培养基配置 基础培养基500 ml;生长添加剂5 ml;胎牛血清1
简介 小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连。小肠与心互为表里。是食物消化吸收的主要场所,盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,全长约5-6米,张开有半个篮球大,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。其管壁由黏膜,黏膜下层,肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,黏膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切。
形态 铺路石状细胞样,不规则细胞样
生长特征 贴壁
细胞 细胞角蛋白-19(CK-19)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
倍增时间 每周 2 至 3 次
换液频率 2-3天换液一次
培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37°C,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
备注 猪小肠上皮细胞永生化通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
【储存条件及期限】
T25瓶:观察好细胞状态后,75 %酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏