【产品简介】
Omni-nuclease(全能核酸酶)制品经过基因工程改造重组表达获得。同Benzonase Nuclease,是由粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)分泌的、由两个大小为26 kDa的亚基组成的一种广谱核酸酶,又称非限制性核酸内切酶,其活力比DNase I强34倍,能以相同的效率酶切单链DNA、双链DNA以及RNA,将其消化成3~5碱基长度(杂交限度以下)的5'-单磷酸寡核苷酸。其发挥活性需要Mg2+,最佳活性pH范围为6~10,最适反应温度为37°C。
本产品在野生型的Benzonase的基础上经过基因工程改进,在酵母中表达纯化所得,无细菌内毒素残留,在非常广泛的条件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4 % TritonX100,0.1 % SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF,0.4 % Sodium deoxycholate)都能保持很高的稳定性和消化活力,非常适用于作为各类科学研究以及疫苗、蛋白、多糖类制药工业的首选酶制剂,去除样本或制品中的核酸残留,提升样本纯度和制品生物功效。
【活性定义】
1活性单位(U)是指在37°C,pH8.0反应条件下,2.625 ml反应体系中,在30 min内使A260吸收峰值变化1.0(相当于完全消化37μg鲱鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量。
【应用范围】
1.降解所有不同形态的DNA及RNA,是疫苗、抗体、细胞治疗及其他生物制品制备过程中去除核酸(DNA和RNA)污染以达到FDA关于治疗性用途的生物制剂终产物中核酸残留不超过10pg/剂标准的最佳工具;
2.通过降解核酸来降低细胞裂解液的粘度(viscosity),有助于在病毒、AAV载体及包涵体等细胞来源颗粒的纯化过程中促进溶液过滤/超滤过程、缩短处理时间、提高离心过程中沉淀与上清的分离效率并提高色谱纯化效率,最终达到提高得率和有效产物纯度的效果;
3.生物分析应用:可用于ELISA样品制备,色谱层析、双相电泳(蛋白质图谱)及印迹分析等等过程中来提高分辨率和样品回收率。
【质量控制】
蛋白纯度检测:本品经SDS-PAGE检测纯度≥95 % 。
蛋白酶残留检测:将本品与蛋白底物在37°C反应条件下温育16h,通过SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白底物无明显变化。
内毒素残留检测:本品内毒素残留<10EU/ml。
【注意事项】
1.进行RNA样品操作时请在RNase-free管中进行加样;
2.Omni-nuclease(Benzonase)的有效工作温度是0~42°C,最佳工作温度是37°C。低温使用酶活性有所降低,可通过多添加2~5倍BenzonaseNuclease或延长消化时间(2~3h)来进行活力补偿;
3.含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品,对该酶活性有部分抑制作用,使用时需要增加酶的用量;
4.酶活性≥250U/ μl,对于小体积制备物,可用稀释缓冲液(20mM Tris-Cl pH8.0,2mM MgCl2,2mM NaCl)稀释到一定浓度,再加入体系中,稀释后溶液在4°C仅能保存数天;
5.产品以液体酶形式提供,直接加入裂解液共同使用即可;
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。
【储存条件及期限】
于-20℃保存