【产品简介】

Thermostable RNaseH，耐热RNaseH，是一种在较高温度(65°C以上)时仍然保持活性的核糖核酸内切酶(endoribonuclease)。Thermostable RNaseH可以选择性识别并酶切RNA:DNA杂合双链中的RNA链，同时杂合双链中的DNA会保持完整。Thermostable RNaseH不会降解单链或双链的RNA或DNA。

【活性定义】

以40pmol荧光标记的25 bpRNA:DNA杂交体为底物，在50µl反应体系中，50°C条件下，20 min内产生1nmol核糖核苷酸所需的酶量定义为1个活性单位（U）。

【应用范围】

1.高精度RNA结构图谱制备和mRNA加帽率分析。

2.cDNA第二链合成中去除mRNA；提高RT-qPCR效率。

3.在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。

4.等温扩增实验中的组份。

【质量控制】

非特异性内切酶活性检测：将5U的本酶与超螺旋质粒DNA在37°C温育4h，通过DNA电泳检测质粒无变化。

DNase残留检测：将5U本酶与双链DNA底物在37°C温育16h，通过DNA电泳检测双链DNA底物无变化。

RNase残留检测：将5U的本酶与500 ngRNA在37°C温育1h，使用琼脂糖凝胶电泳检测超过90 % 的RNA仍保持完整。

宿主DNA残留检测：本品中大肠杆菌宿主细胞DNA残留量低于10拷贝/5U。

【注意事项】

1.Thermostable RNaseH反应缓冲液包含MgCl₂。目标RNA:DNA杂交体和其它单链RNA（总RNA）在高温下使用Thermostable RNaseH时，建议控制反应时间和温度，以降低金属离子的单链RNA的降解。

2.Thermostable RNaseH可以通过添加蛋白酶K或过量的EDTA来失活。

3.最佳反应温度>65°C,最高95°C。Thermostable RNaseH在65°C时的活性是37°C时的3到4倍。

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并带一次性手套操作。