【产品简介】
核糖核酸酶A(RibonucleaseA),简称RNaseA,是一种核糖核酸内切酶,含有四个二硫键,分子量约13.7kDa。可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3'端,切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键,反应终产物是嘧啶3'磷酸及末端带嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。
RNaseA切割单链RNA的活性最高,在不同反应条件下表现出不同的切割活性:在低盐浓度(0~100mM NaCl)下,可用来切割单链RNA、双链RNA以及RNA-DNA杂交形成的RNA链,然而高盐浓度(≥0.3M)下,RNaseA仅特异性切割单链RNA。
【活性定义】
酶活力:≥80 KunitzU/mg。
【应用范围】
1.去除质粒和基因组DNA提取过程中的RNA;
2.去除重组蛋白制剂中的RNA;
3.核糖核酸酶保护试验;
4.RNA序列分析。
【使用方法】
蛋白纯度:经SDS-PAGE凝胶电泳检测,蛋白纯度不低于85 % 。
DNase活性:37°C下,在20 μl 1× Buffer反应体系中将10μgRNaseA与15 ng双链DNA片段共同温育16h后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA片段无变化。
功能活性:37°C下,在10 μl反应体系中将5 ng RNaseA与1μgRNA共同温育1h后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,RNA完全消失。
【注意事项】
1.本品不含DNase,可直接溶解后使用,推荐工作浓度1~100μg/ml,推荐的储存缓冲液为50mMTris-HCl(pH7.4)和50 % 甘油。
2.本品无法热失活,建议用离心柱或者酚氯仿抽提来充分去除。
【储存条件及期限】
于-20℃保存