耐热RNase T1(切割位点:G后) Thermostable RNase T1
产品编号:SB-EGR232S 产品规格: 产品品牌:圣尔生物share-bio  一键复制产品信息
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产品简介

Thermostable RNase T1是一种基于RNase T1经过蛋白定向进化得到的耐热突变体。与野生型RNase T1相比,Thermostable RNase T1能够在50°C的条件下保持100 % 的活性,而野生型在同样的温度下活性至少下降50 % 。更高的反应温度有助于充分打开RNA的二级结构,减少或避免其对酶切的影响,从而使酶切过程更加彻底。

活性定义

1活性单位(U)是指在37°C,pH7.5条件下,以酵母RNA为底物,使A260变化1.0所需要的酶量。

应用范围

1.去除DNA中的RNA

2.去除重组蛋白中的RNA

3.RNA测序;

4.用于核糖核酸酶保护试验(与RNaseA结合使用);

5.测定不含G或低G含量DNA模板的转录水平。

质量控制

蛋白纯度:经SDS-PAGE凝胶电泳检测,蛋白纯度不低于95 %

非特异性内切酶活性:37°C下,在20 μl反应体系中将500U Thermostable RNase T1200 ng超螺旋质粒DNA共同温育4h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,少于20 % 的质粒DNA转变成缺刻或线性状态。

DNase活性:37°C下,在20 μl反应体系中将500U Thermostable RNase T115 ng双链DNA片段共同温育16h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA片段无变化。

使用方法

1.反应体系

试剂

体积

终浓度

ssRNA

1-10 μg

50~500 ng/μl

10× RNase T1 Buffer

2 μl

RNase Inhibitor (40 U/μl)

1 μl

2 U/μl

Thermostable RNase T1 (500 U/μl)

0.4 μl

10 U/μl

Nuclease-Free Water

To 20 μl

-

 :为避免RNaseA等环境中的RNase污染使底物RNA降解,建议在反应体系中加入RNase Inhibitor,底物RNA应在RNase Inhibitor加入并混匀之后加入。

2.推荐的反应条件

50°C孵育15 min。可根据实际情况适当延长或缩短孵育时间以达到最佳酶切效果。

注意事项

1.Thermostable RNase T1的热失活是可逆的,建议通过柱纯化或酚/氯仿抽提的方法去除Thermostable RNase T1

2.RNase相关实验请在通风橱或特定区域进行,以避免对其他实验产生影响。

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。

【储存条件及期限】 于-20℃保存
搜索质检报告(COA)
搜索MSDS

For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.

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