【产品简介】

BbvCI 来源于短芽孢杆菌（Bacillus brevis）（L. Ge）的 BbvCI 基因，二聚体形式重组表达获得。BbvCI 属于 Type IIA 类限制酶，具有异源二聚酶样结构，由两个不同的催化亚基组成，每个亚基具有独立的切割位点，识别并切割非回文序列 CCTCAGC（-5/-2），形成 5' 端 3 碱基突出的粘性末端。BbvCI 使用圣尔通用酶切Buffer，可与其他圣尔快速限制性内切酶进行双酶切，但不建议长时间酶切（超过 3 h），以避免产生星号活性。

BbvCI 在圣尔通用酶切Buffer 或圣尔 Color Buffer 中都具有优良的活性。圣尔 Color Buffer 包括红色和黄色的显色染料，可将产物用于凝胶电泳。圣尔 Color Buffer 中的红色染料与 25 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

【产品组成】

【识别序列】

CCTCAGC（-5/-2）

【酶切位点】

5'...C C ↓ T C A G C...3'

3'...G G A G T ↑ C G...5'

【同裂酶】

PdmI, MroXI

【反应温度】

37℃

【失活条件】

80℃温育20 min

【活性定义】

1 活性单位 (U) 是指在 50 μL 反应体系中，37 ℃ 1 h 内完全酶切 1 μg λDNA 所需的酶量。

【质量控制】

功能活性检测

37 ℃ 下，2 U BbvCI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA。

超长时间温育检测

37 ℃ 下，将 2 U BbvCI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。延时酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测

37℃下，使用 2 U BbvCI 消化底物，回收酶切产物。在 22℃下使用适量 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。