种属 人
别称 C33A+DDP
组织来源 子宫;宫颈。
疾病 宫颈癌
传代比例/细胞消化 1:2传代,消化2-3分钟。
完全培养基配置 MEM培养基;10%胎牛血清;1%双抗 :0.5μg/ ml
简介 C-33 A 细胞株是N. Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株(参见ATCC CRL-1594和ATCC CRL-1595)中的一株。 细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态。 连续传代可以观察到核型不稳定。 存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常。 P53表达上调,且有一个273位密码子的点突变导致Arg -> Cys的替换。 人乳头瘤病毒DNA及RNA阴性。
形态 上皮细胞样
生长特征 贴壁生长
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:13;D16S539:13,14;D18S51:15,18;D19S433:11,13,14;D21S11:29,30,31;D2S1338:23,25;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:10,14;FGA:21,26;TH01:7,8;TPOX:9;vWA:18,20
倍增时间 每周 2-3次
培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37°C,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
保藏机构 收到细胞后按照下面的要求操作:培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到 40-50%的汇合度时,去掉培养液,加入含0.25μg/ ml药物的培养液,放入培养箱,这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来,但是不要紧,通过换液可以去掉,下面的细胞待长满就可以消化传瓶了,一两代之后可以将药物浓度提高到0.5μg/ ml,含药培养液用于细胞培养都没问题的,冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。(注明:用不含药物培养基培养一周到两周,再用含药培养基培养。)如需进行实验,请提前至少1周更换为正常培养基培养。
【储存条件及期限】
T25瓶:观察好细胞状态后,75 %酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏