种属 人
组织来源 椎间盘组织
传代比例 1:2传代
完全培养基配置 基础培养基500 ml;生长添加剂5 ml;胎牛血清
简介 髓核,是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质,发育成熟的髓核是一个由软骨样细胞分散在细胞间质内,周围围绕着一个比较致密的胶原纤维网的含水球,位于椎间盘偏后位置,占推间盘横断面积的50%~60%;由于它的含水量很高,并和软骨终板紧密接触,是椎间盘接受经软骨终板主要营养途径渗透交换营养的主要部分。
形态 长梭形细胞样,不规则细胞样
生长特征 贴壁
细胞 Ⅱ型胶原荧光染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
倍增时间 每周 2 至 3 次
换液频率 2-3天换液一次
培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37°C,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
备注 人原代髓核细胞永生化通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
【储存条件及期限】
T25瓶:观察好细胞状态后,75 %酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏