种属 人
组织来源 患风湿性关节炎病人的关节滑膜组织
传代比例 1:2传代,消化1-2分钟。
完全培养基配置 基础培养基500 ml;生长添加剂5 ml;胎牛血清50 ml;双抗5 ml
简介 滑膜是关节囊的内层,淡红色,平滑闪光,薄而柔润,由疏松结缔组织组成。关节腔内的所有结构,除关节软骨、半月软骨板以外,即便是通过关节腔的肌腱、韧带等均全部为滑膜所包裹,滑膜分泌滑液,在关节活动中起重要作用。正常滑膜分为两层,即薄的细胞层(内腔层)和血管层(内膜下层),是血管丰富的关节囊内膜,贴附于非关节面部分,覆盖于关节囊内的骨面上,不在软骨面上,此部分称为边缘区或“裸区”。滑膜呈粉红色,光滑发亮、湿而润滑,有时可见绒毛,内含胶原性纤维,滑膜细胞有A、B两型。巨噬细胞样A型细胞,表面有丝状伪足、浆膜内陷、囊泡、线粒体、溶酶体、胞浆纤维和高尔基体,具有吞噬功能;B型成纤维样滑膜细胞(FLS) ,有高浓度的内质网结构,是介导 RA 关节破坏的主要细胞。
形态 成纤维样细胞样
生长特征 贴壁
细胞 波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
倍增时间 每周 2 至 3 次
换液频率 2-3天换液一次
培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37°C,培养箱湿度为70%-80%。
冻存条件 冻存液:90%FBS,DMSO 10%,
备注 人风湿性关节滑膜成纤维细胞永生化该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
【储存条件及期限】
T25瓶:观察好细胞状态后,75 %酒精消毒T25瓶外壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态后传单;冻存管:收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏