【细胞详情】

种属：人

别称：HCT-116+Oxaliplatin

组织来源：结肠

疾病：结肠癌

传代比例/细胞消化：1:2传代,消化2-3分钟

完全培养基配置：McCoy’s 5A培养基；10%胎牛血清；1 μg/ mL Oxaliplatin；1%双抗

简介：HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克 隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性 ，形成上皮样的肿瘤。

形态：上皮细胞样

生长特征：贴壁生长

STR：Amelogenin：X，Y；CSF1PO：7，10；D13S317：10，12；D16S539：11，13；D18S51：16，17；D19S433：12，13；D21S11：29，30；D2S1338：16；D3S1358：12，18，19；D5S818：10，11；D7S820：11，12；D8S1179：12，14；FGA：18，23；TH01：8，9；TPOX：8；vWA：17，22；

倍增时间：每周2-3次

培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37°C，培养箱湿度为70%-80%。

冻存条件：冻存液：90%FBS，DMSO 10%

备注：收到细胞后按照下面的要求操作：培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到40-50%的汇合度时，去掉培养液，加入含0.5 μg/ mL Oxaliplatin药物的培养液，放入培养箱，这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来，但是不要紧，通过换液可以去掉，下面的细胞待长满就可以消化传瓶了，一两代之后可将药物浓度提高到1μg/ mL，含药培养液用于细胞培养都没问题的，冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。（注明：用不含药物培养基培养一周到两周，再用含药培养基培养）如需进行实验，请提前至少1周更换为正常培养基培养。

【注意事项】

1. 需要用好点的胎牛血清培养，初次定培养可以用15%血清缩短细胞适应期，稳定后再在降至10%。

2. 我们消化方法：PBS清洗细胞后，加入0.7 mL胰酶(不需要吸出)，然后转移至显微镜下观察，每隔5-10 s用力拍打瓶壁两侧(至关重要)，至细胞脱落约50-70%左右后，尽快转移至操作台终止消化，后分瓶培养即可。

3. 此细胞容易消化，千万不要放置到培养箱中计算时间消化，也不要等细胞自己收缩变圆，会导致消化过度。细胞消化过度的现  象为第二天可看到很多细胞不贴壁，飘在培养基中。