产品简介

在组织切片过程中一些组织内含有骨质或钙化灶时，含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片，这是因为钙和石蜡之间的密度不同，较难切出完整的切片，对含钙组织最好固定之后再进行脱钙或二者同时进行，然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。 用于脱钙的试剂很多，脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙， AFIP甲酸-柠檬酸脱钙液主要由甲酸、枸橼酸钠等组成，其原理在于柠檬酸钠可以螯合钙离子。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

自备试剂

1、 PBS、蒸馏水 2、 加热装置或微波炉、脱钙专用容器(玻璃)

使用方法

1、骨组织脱钙时，取材不易过厚，一般大约5mm。 2、组织固定后，用PBS清洗3次，每次20min。 3、组织用蒸馏水洗清洗3次，每次20min。 4、组织转移至20~30倍体积的AFIP甲酸-柠檬酸脱钙液中，每日更换1次。 5、用蒸馏水冲洗数次，常规脱水、包埋。

技术资料

脱钙终点的测定(物理法)：采用针刺、手掐、钳夹等方法，当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙；物理检测法会对组织结构有一定的损害， 尽量避免用力过大或反复检测。

注意事项

1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙3~7天即可。 2、适当加温能加快脱钙的速度，一般不应超过37～40℃，温度过高容易使骨组织造成松散解体，尤其不可大于60℃。 3、脱钙应彻底，防止脱钙不足或过度，脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间，以免脱钙过长引起组织损害。 4、脱钙用具避免使用金属容器，尽量使用玻璃容器。 5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行，不应先脱钙后固定，以便减少组织的损伤程度。 6、每隔一段时间检测一次脱钙程度，脱钙过度会增加组织的损伤程度，影响染色结果。