【产品简介】
SgeI可切割在单链或双链DNA上含有5-甲基胞嘧啶的DNA靶标。SgeI 限制性内切酶可识别 ᵐ⁵CNNG(9/13)^位点,并于37°C下在其独特的缓冲液中的切割效果最佳。为确保一致的性能,该酶Storage Buffer中包含预混合BSA,其可增强酶的稳定性,并与 DNA 制剂中可能存在的污染物相结合。
【识别序列】
ᵐ⁵CNNG(9/13)
【酶切位点】
5'...ᵐ⁵C N N G(N)₉↓...3'
3'... G N N C(N)13 ↑...5'*
【反应温度】
37℃
【失活条件】
80℃温育20 min
【甲基化敏感性】
Dam:noeffect.;Dcm:impaired.;CpG:impaired.;EcoKI: noeffect.;EcoBI:noeffect.
【酶活定义】
在1× SgeI Buffer条件下,1 μg pUC19-SgeI DNA (Dcm+)在50 μL反应体系中37℃孵育1 h,不断增加酶量,直至酶切产物 DNA带型不随着酶量的增加而发生变化,此时酶量定义为 1 U。
【质量控制】
核酸内切酶残留检测
将3 U Sgel与超螺旋质粒DNA 在37℃温育4 h,通过DNA电泳检测质粒无变化。
核酸外切酶残留检测
将5 U Sgel与双链DNA 底物在37℃温育1 h,通过DNA电泳 检测双链DNA底物无变化。
【储存条件及期限】
-20°C