【产品简介】
XmnI 属于 Type IIP 型限制酶,来源于木薯萎蔫病黄单胞菌(Xanthomonas manihotis),经大肠杆菌重组表达后纯化获得。XmnI 识别并切割 GAANN/NNTTC 序列,切割后形成平末端,在 Cut Buffer C 中表现最佳的性能与星号活性控制。XmnI 可兼容圣尔通用酶切Buffer,方便与其他内切酶联用实现快速双酶切,但应避免长时间酶切,以防止出现星号活性。
【识别序列】
GAANN/NNTTC
【酶切位点】
5'...G A A N N ↓ N N T T C...3'
3'...C T T N N ↑ N N A A G...5'
【同裂酶】
PdmI, MroXI
【反应温度】
37℃
【失活条件】
80℃温育20 min
【活性定义】
1 活性单位 (U) 是指在 50 μL 反应体系中,37 ℃ 1 h 内完全酶切 1 μg λDNA 所需的酶量。
【质量控制】
功能活性检测
37 ℃ 下,10 U XmnI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA。
超长时间温育检测
37 ℃ 下,将 10 U XmnI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。延时酶切可能出现星号活性。
酶切-连接-再酶切检测
37℃下,使用 10 U XmnI 消化底物,回收酶切产物。在 22℃下使用适量 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
【储存条件及期限】
-20℃保存2年。