【产品简介】

ApeKI来源于超嗜热需氧古生菌(Aeropyrum pernix) K1，属于Type IIP型限制酶，识别并切割G/CWGC序列，形成3碱基突出的粘性末端。ApeKI是基因组简化测序（genotyping-by-sequencing，GBS）的首选酶之一，此外，还广泛应用于动植物遗传研究、群体进化分析及功能基因定位等领域。

【识别序列】

GCWGC

【酶切位点】

5'...G ↓ C W G C...3'

3'...C G W C ↑ G...5'

【同裂酶】

TseI

【反应温度】

75℃

【失活条件】

不可热失活，请使用酚氯仿抽提或柱纯化。

【活性定义】

1 活性单位 (U) 是指在 50 μL 反应体系中，75 ℃ 1 h 内完全酶切 1 μg λDNA 所需的酶量。

【质量控制】

功能活性检测

75 ℃ 下，10 U ApeKI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA。

 超长时间温育检测

75 ℃ 下，将 10 U ApeKI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。延时酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测

75 ℃下，使用 10 U ApeKI 消化底物，回收酶切产物。在 22℃下使用适量 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。