【产品简介】

BpiI 属于 Type IIS 型限制酶，特异性识别 GAAGAC 序列，并在下游进行切割，产生 4 碱基突出端的 5' 末端，为 Golden

Gate 组装的常用酶之一。BpiI 使用 圣尔通用酶切Buffer，可搭配圣尔快速内切酶进行双酶切，用于 Golden Gate 组装的常规克隆或酶切鉴定等场景。

BpiI 在圣尔通用酶切Buffer 或圣尔Color Buffer 中都具有优良的活性。圣尔Color Buffer 包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。圣尔Color 红色染料与 2500 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10 bp双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

【识别序列】

GAAGAC(2/6)

【酶切位点】

5'...G A A G A C (N)₂↓...3'

3'...C T T C T G (N)₆↑...5'

【同裂酶】

BstV2I, BbsI

【反应温度】

37℃

【失活条件】

80℃温育20 min

【活性定义】

1 活性单位 (U) 是指在 50 μl 反应体系中，37℃ 1 h 内完全酶切1 μg λDNA 所需的酶量。

【质量控制】

功能活性检测

37℃下，10 U BpiI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA。

超长时间温育检测

37℃下，将 10 U BpiI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。延时酶切可能出现星号活性。

酶切-连接-再酶切检测

37℃下，使用 10 U BpiI 消化底物，回收酶切产物。在 22℃下使用适量 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。