【试剂盒组成】
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缓冲液名称
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20 T
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40 T
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100 T
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储存温度
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Protein A/G 磁珠
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1 mL
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2 mL
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5 mL
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4°C
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5×洗涤缓冲液
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20 mL
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50 mL
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100 mL
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室温
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洗脱缓冲液
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1.2 mL
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2.8 mL
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5.2 mL
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室温
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中和缓冲液
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120 μL
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280 μL
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520 μL
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室温
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【产品概述】
Protein A/G磁珠是一种高性能亲和磁珠，包被经基因工程改造的、同时含有Protein A及Protein G的IgG结合结构域的重组融合蛋白，具有高容量、低非特异性结合等特点。与单独使用Protein A或者Protein G偶联的磁珠相比，Protein A/G磁珠可从更广泛的物种和同种型范围中捕获抗体或抗原，可应用于细胞裂解物、细胞分泌液上清以及其他的免疫抗原的分离纯化等。
【微珠属性】
适用范围 IP、Co-IP、ChIP、抗体纯化
磁珠浓度 10 mg/mL
磁珠直径 1 μm
IgG结合量 ＞80 μg兔IgG/mg磁珠
适用抗体种属 广谱抗体种属
耐受高温 不耐高温
配基 蛋白A/G
【试剂准备】
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缓冲液名称
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成分
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推荐使用圣尔产品
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Lysis buffer
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50 mM Tris-HCl pH7.5; 150 mM NaCl; 1% TritonX-100; 1 mM EDTA
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IP&co-IP裂解、结合、清洗buffer
（圣尔#SB-IP011）
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RIPA buffer
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50mM Tris (pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40，0.25% sodium deoxycholate等
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细胞/组织裂解液RIPA（弱）
（圣尔#SB-BR040R）
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2×SDS loading buffer
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120 mM Tris-HCl pH6.8; 20% glycerol; 4% SDS； 0.04% Bromophenol blue;10% β-mercaptoehanol
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SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X无气味)（圣尔#SB-PR039）
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蛋白酶抑制剂
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1 M PMSF
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复合型蛋白酶抑制剂（100×)
（圣尔#SB-WB016）
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磁力架
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适配1.5/2 mL EP管
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16孔磁力架（1.5/2 mL EP tube）
（圣尔#SB-IP004）
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注意：使用前在Lysis buffer、IP&co-IP裂解、结合、清洗buffer（圣尔#SB-IP011）中添加适量的蛋白酶抑制剂。
【注意事项】
1 严禁冻结。
2 密闭保存，避免干燥，保持微珠浸于储液。
3 本品为悬液，使用前需充分混匀，微珠彻底悬浮后吸取，使用过程中避免高速离心。
4 蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4℃或冰浴，以减缓蛋白降解或变性。为有效抑制蛋白降解，强烈建议在蛋白样品、Lysis buffer、Wash buffer中都添加适量的蛋白酶抑制剂。细胞裂解物可置于-80°C下长期保存。
5 裂解核蛋白，可在PIPA（强）裂解液中加入1mg/mL DNaseI、2.5 mM MgCl2、蛋白酶抑制剂和1 mM PMSF。
6 在结合反应过程中，微珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象。
7 当目标蛋白分子量大小为50 kD或者25 kD时，建议更换轻链抗体/重链抗体，或使用纳米抗体磁珠，以尽量减少变性重链或轻链对SDS-PAGE和WB结果产生的干扰。
8 质控取样点1：样本充分裂解后，取数十微升样本，记作Input，即为反应前样本；质控取样点2：样本免疫沉淀孵育结束后，取上清样本10-50 μL，记作supernatant，即为上清样本。
9 缓冲液最大兼容性：1mM DTT（二硫苏糖醇）；3 M 脈盐•HCI；8 M 尿素；2 M NaCl；2% NP-40；1% SDS；1% Triton X-100
【储存条件及期限】
存放于4°C，微珠禁止冻结，有效期12个月；冰袋运输
