【产品简介】

Firefly & Renilla Assay Kit (双萤光素酶报告基因检测试剂盒)为检测基因的表达量提供有效的手段，在DLR检测中，萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase) 和海肾萤光素酶(Renilla luciferase) 的活性可在单个样品中依次检测。先以萤光素(Luciferin) 为底物来检测萤火虫萤光素酶的活性，然后加入抑制萤火虫萤光素酶催化的物质， 同时加入腔肠素(Coelenterazine) 检测海肾萤光素酶的活性，实现双萤光素酶报告基因检测。通过萤光素酶和其底物这一生物发光体系， 可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5' 启动子区克隆在Luciferase 的上游，或把3'-UTR 区克隆在Luciferase 的下游， 构建成报告基因(Reporter gene) 质粒， 然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，通过检测萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶更多地被用作检测转染效率的内参，以消除细胞数量和转染效率的差异。

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61 kDa 的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化萤光素生成氧化萤光素(Oxyluciferin)，在萤光素被氧化的过程中，会产生光信号。海肾萤光素酶是一种分子量约为36 kDa 的蛋白，在氧气存在的条件下， 可以催化腔肠素氧化成肠酰胺(Coelenteramide) ，在腔肠素氧化的过程中也会产生光信号。本试剂盒的光信号可以通过化学发光仪、酶标仪或液闪测定仪进行测定。该试剂盒具有检测迅速、灵敏度高、检测范围广，无细胞内源活性干扰等特点。